ПЦР-анализ: что это такое, когда он назначается и как проводится?
Одним из наиболее точных и современных методов диагностики является полимеразная цепная реакция (ПЦР). Созданный ученым Кэри Муллисом, данный метод попал в число обладателей Нобелевской премии в 1993 году. Это высокотехнологичный лабораторный способ диагностики, который дает возможность выявить различные заболевания на ранней стадии.
Если вам назначено исследование с помощью ПЦР-диагностики, то следует знать, что она проводится специалистами в лабораторных условиях. Для анализа небольшой образец материала — крови, слюны, ткани и т.д. — помещают в специальную пробирку, куда добавляются растворы, необходимые для реакции.
Ответы на все интересующие вас вопросы по ПЦР-диагностике, в том числе о том, как подготовиться к анализу, можно найти в этой статье.
Метод ПЦР, основанный на принципах молекулярной биологии, широко используется в диагностике многих заболеваний. Суть этого подхода заключается в использовании специальных ферментов, которые многократно копируют фрагменты РНК и ДНК возбудителей болезни, которые находятся в биологических пробах, например в крови.После этого специалисты лаборатории проводят анализ полученных фрагментов, сверяя их со специальной базой данных. Это позволяет выявить тип возбудителя болезни и определить его концентрацию в биоматериале.
Для проведения ПЦР-диагностики используется амплификатор - специальное устройство, которое нагревает и охлаждает пробирки с биологическим материалом. Нагревание и охлаждение необходимы для проведения репликации. При этом точность температурного режима оказывает существенное влияние на точность результата.
Области применения метода ПЦР
Метод ПЦР имеет огромный диагностический потенциал, благодаря которому можно обнаружить широкий спектр инфекций.
ПЦР-анализ широко используется для диагностики ВИЧ, герпеса, различных половых инфекций (таких как хламидиоз, уреаплазмоз, гарднереллез, микоплазмоз, трихомониаз), кандидоза, гепатитов, мононуклеоза, листериоза, цитомегаловируса, туберкулеза, вируса папилломы человека и клещевого энцефалита [3,4]. Но это далеко не полный список, поскольку ПЦР-метод широко используется в разных областях медицины.
В свете нынешней сложной эпидемиологической обстановки, метод ПЦР стал незаменимым инструментом для диагностики вирусных заболеваний, включая коронавирусную инфекцию COVID-19.
Кроме медицины, метод ПЦР также используется в криминалистике для идентификации биоматериала, найденного на месте преступления. Также, ПЦР-анализ может быть применен для установления отцовства.
Таким образом, метод ПЦР имеет широкий диагностический потенциал и успешно используется в разных сферах.
Плюсы и минусы ПЦР-диагностики
Диагностика методом ПЦР имеет ряд преимуществ, которые максимально использованы современной медициной. Одним из самых значительных достоинств является высокая чувствительность метода. Даже если в организме находится лишь несколько молекул ДНК возбудителя болезни, ПЦР-анализ позволяет выявить его на очень ранней стадии заболевания. Также метод эффективен при латентных формах болезни, когда она не проявляется вовсе.
ПЦР-анализ может быть проведен на любом биоматериале: на крови, слюне или клетках кожи, что делает его универсальным методом. Кроме того, одновременно можно исследовать несколько возбудителей болезни, что существенно расширяет возможности метода. Результат анализа готов уже через несколько часов, что делает метод быстрым и удобным для пациентов.
Проблемы при использовании ПЦР-диагностики связаны с высокими требованиями к технологии и профессионализму лаборантов. Если образец был загрязнен, анализ может дать ложный результат, что необходимо учитывать при его проведении. Это недостаток метода, который может быть преодолен соответствующими системами контроля качества работы лаборатории. В целом ПЦР-диагностика является точным и эффективным методом исследования, который успешно применяется в современной медицине.
Изучаемый материал для ПЦР-диагностики заболеваний может быть различным, и выбор зависит от типа инфекции. Например, при анализе на ЗППП методом ПЦР используют соскоб или мазок из шейки матки или уретры, а также мочу. Для обнаружения герпеса, цитомегаловируса, гепатита, токсоплазмоза и ВИЧ, необходима кровь. Мазок из зева используется для анализа на мононуклеоз и цитомегаловирус. В случае поражений нервной системы, спинномозговая жидкость является подходящим материалом для анализа. Ткани плаценты изучаются для выявления внутриутробных инфекций, а для обнаружения легочных инфекций используют мокроту или плевральную жидкость.Подготовка к ПЦР-диагностике зависит от биоматериала, который будет использован.
Для сдачи крови необходимо быть натощак утром.
Сбор мочи необходимо осуществлять в стерильный контейнер утром и передать в лабораторию в течение двух часов.
Если необходимо взять мазок или соскоб из урогенитальной области, необходимо воздержаться от половых контактов за несколько дней до сбора материала, а также не проводить спринцевания.
Сдачу мазков или соскобов необходимо отложить на время менструации.
Пациент, который принимает лекарства или БАД, должен сообщить об этом врачу, так как действующие вещества средства могут исказить результаты лабораторного анализа, и возможно, понадобится остановить курс приема.
Существует множество методов ПЦР-диагностики различных заболеваний. К ним относятся, например, ПЦР в реальном времени, секвенирование, пиросеквенирование, микрофлюидные технологии. На данный момент наиболее распространенным является проведение анализа с помощью ПЦР в реальном времени, который практически исключает возможность ложноположительных результатов. Кроме того, обработка образцов при использовании этого метода значительно сокращается. Получить результаты можно уже через один час.
Рерайт статьи "Как расшифровать результаты ПЦР-исследования"
Важной задачей для любого пациента является понимание результатов ПЦР-анализа, который может быть положительным или отрицательным. Если результат отрицательный, это указывает на отсутствие следов враждебной ДНК в организме, и тест можно считать успешным. Однако, если результат положительный, значит, в организме есть фрагменты ДНК возбудителя болезни, и необходимо лечение.
Часто ПЦР-диагностика может показать положительный результат, несмотря на отсутствие недомогания и симптомов болезни у пациента. В таких случаях заболевание может находиться на ранних стадиях, что требует проведения дополнительных исследований и немедленного начала лечения. Чем раньше болезнь будет выявлена, тем больше шансов на ее успешное лечение.
ПЦР-диагностика инфекций является очень точным методом. Он позволяет выявить возбудителя болезни даже при наличии всего одной молекулы его ДНК в пробе. Это делает ПЦР-анализ одним из наиболее эффективных инструментов для определения наличия инфекции и контроля за эффективностью лечения.
Фото: freepik.com